زهرا محمدی آبگرمی [1] ، دکتر محمدحسن خادم انصاری [2] ، دکتر بمانعلی جلالی خانآبادی [3] ، دکتر محمدحسين مصدق مهرجردی [4] ، سيدمجيد مهدوی [5] تاريخ دريافت 26/06/87 تاريخ پذيرش 29/08/87 چکيده پيش زمينه و هدف: آترواسکلرور و بيماری عروق کرونر قلبی ( CAD )، عامل مرگ و مير در کشورهای صنعتی و همچنين کشورهای در حال توسعه ميباشد. مالون دی آلدهيد محصول نهايی پراکسيداسيون ليپيدهاست. روشهای متعددی برای ارزيابی پراکسيداسيون ليپيدها ارائه شده است هدف اصلی از اين مطالعه تحقيق و ارزيابی روشهای تيوباربيتوريک اسيد ( TBARS ) و کروماتوگرافی با کارايی بالا (HPLC) برای تعيين و مقايسه مالون دی آلدهيد (MDA) در گروهی از مبتلايان به تنگی عروق کرونر و افراد شاهد بوده است. مواد و روش کار : افراد مورد مطالعه شامل 47 نفر شاهد و 53 نفر مبتلا به CAD بودند. نمونه خون بعد از يک شب ناشتا ماندن تهيه و سرم جدا گرديد. برای اندازه گيری MDA ابتدا پروتئين های سرم با استفاده از محلول تری کلرواستيک اسيد رسوب داده شده و با عمل سانتريفوژ جدا گرديد. محلول صاف شده رويی با اسيد تيوباربيتوريک در حرارت 95 درجه سانتيگراد و به مدت 50 دقيقه واکنش داده شد . برای تعيين MDA به روش تيوباربيتوريک اسيد، مجموعه رنگی حاصل در طول موج 532 نانومتر سنجش شد. برای روش HPLC ، 20 ميکروليتر از مجموعه رنگی حاصل به ستون فاز معکوس HPLC تزريق و پس از شستشو به روش ايزوکراتيک، مجموعه رنگی حاصل جداسازی و با دتکتور مرئی در طول موج 532 نانومتر اندازهگيری شد. يافته ها: درصد بازيابی روشهای HPLC و TBARS بهترتيب بين 05/92 تا 2/105 و 7/84 تا 102 درصد بهدست آمد. ضريب تغييرات روش HPLC در حدود 17/6-4 درصد و برای روش TBARS در حدود 22/12-27/7 درصد محاسبه گرديد. حد تشخيص روش HPLC و روش TBARS بهترتيب 05/0 ميکرومولار و 1/0 ميکرومولار بهدست آمد. سطح سرمی MDA تعيين شده با روش تيوباربيتوريک اسيد از سطح بهدست آمده به روش HPLC بهطور معنيداری بالا بود ( 002/0 p value = ). همچنين ميانگين سطح سرمی MDA در بيماران مبتلا به تنگی عروق کرونر قلب بالاتر از افراد گروه کنترل بود. همبستگی معنيداری بين نتايج حاصل از سنجش MDA به روش تيوباربيتوريک اسيد با نتايج حاصل از تعيين اين ترکيب به روش HPLC بهدست آمد (02/0 P value = و 325/0 r2 = ). بحث و نتيجه گيری: اگر چه روش HPLC روش دقيق و صحيحی برای اندازهگيری MDA در مايعات بيولوژيک ميباشد، ولی اين روش وقت گير و پرهزينه است. بنابراين با ايجاد شرايط مناسب و بهبود کيفيت در روش تيوباربيتوريک اسيد ميتوان نتايج قابل قبولی را از اين روش انتظار داشت و از آن برای کارهای روتين آزمايشگاهی و مطالعات اپيدميولوژيکی استفاده نمود. براساس اين مطالعه و همچنين مطالعات قبلی، سطح سرمی MDA در بيماران عروق کرونر بالاتر از افراد شاهد بوده و بدين ترتيب اندازهگيری MDA بهعنوان يک عامل خطرساز مستقل و يا بهعنوان شاخصی از وجود آترواسکلروز و بيماريهای قلبی عروقی مطرح ميباشد. کليد واژهها: مالون دی آلدهيد، کروماتوگرافی با کارايی بالا، تيوباربيتوريک اسيد، بيماری عروق کرونر قلبی مجله پزشکی اروميه، دوره نوزدهم، شماره چهارم، ص 294-289 ، زمستان 1387 آدرس مکاتبه : اروميه، دانشکده پزشکی، گروه بيوشيمی و تغذيه، تلفن: 2770969-0441 E-mail: mhansari@hotmail.com
[1] کارشناس ارشد بيوشيمی بالينی، دانشگاه علوم پزشکی شهيد صدوقی يزد [2] دانشيارگروه بيوشيمی بالينی، دانشگاه علوم پزشکی اروميه (نويسنده مسئول) [3] استاديار گروه بيوشيمی بالينی، دانشگاه علوم پزشکی شهيد صدوقی يزد [4] استاديار گروه فارماکولوژی، دانشگاه علوم پزشکی شهيد صدوقی يزد [5] کارشناس ارشد آزمايشگاه گروه فارماکولوژی، دانشگاه علوم پزشکی شهيد صدوقی يزد |